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NEWS影响ELISA试验结果的因素有哪些?ag尊龙凯时解析。
来源:尹军世 日期:2025-03-16ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种广泛应用于生物医学研究中的固定相酶免疫测定方法,适用于检测抗原和抗体。一方面,研究人员能够将已知的抗体或抗原结合在固相载体上,并保持其免疫活性;另一方面,在测定过程中,待检样本与酶标抗原或抗体按照不同步骤进行反应,通过洗涤手段分离出抗原-抗体复合物和游离成分。最后,通过加入酶底物催化显色,实现定性或定量的检测。
为了确保实验数据的准确性,在ELISA实验中必须贯彻全面的质量控制措施,并制定详尽的标本收集计划。血清是ELISA试剂盒中常用的样本,而血浆通常也被视为同等的样本。然而,样本引发的假阳性或假阴性结果主要是由于内源性和外源性干扰物质造成的。
研究指出,约40%的血清样本中可能含有非特异性干扰物质,包括类风湿因子、补体、嗜异性抗体及其他相关物质。这些物质会在检测中产生假阳性或假阴性结果。例如,类风湿因子(RF)可与ELISA系统中的抗体直接结合,导致错误结果。解决方案包括使用F(ab)2替代完整的IgG,或用热变性处理样本。
外源性干扰物质通常源于不当的采集和储存过程,如溶血、细菌污染等。溶血样本会释放血红蛋白,使ELISA测定中出现非特异性显色,从而影响检测结果。同时,细菌污染的样本也可能引入内源性酶,从而干扰结果。因此,在样本采集时,需严格控制溶血和不当保存等因素,确保标本的新鲜度和稳定性。
为避免假阳性和假阴性结果,建议在冰箱中短期储存样本(不超过5天),超过此时间需进行低温冷冻。解冻后的样本需要轻柔混匀,以防蛋白质定向分布不均。此外,充分凝固后分离血清将有助于减少干扰。
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综上所述,ELISA检测中出现的假阳性或假阴性结果,往往与试剂和操作因素无关,更需要关注样本因素。通过相应措施的实施,研究者能够获得更为准确的检测结果,进而为临床提供可靠依据。
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